ესტროგენის რეცეპტორი (ER) / პროგესტერონის რეცეპტორი (PR) (CTCs)

ER/PR ძუძუს კიბოს დროს: მიმოხილვა

ესტროგენის რეცეპტორი (ER) და პროგესტერონის რეცეპტორი (PR) გადამწყვეტი ბიომარკერებია ძუძუს კიბოს დროს. მათი არსებობა სიმსივნურ უჯრედებში მიუთითებს იმაზე, რომ კიბო ჰორმონმგრძნობიარეა, რაც ნიშნავს, რომ მის ზრდას ხელს უწყობს ესტროგენი და/ან პროგესტერონი. ეს ჰორმონალური დამოკიდებულება ამ კიბოებს მგრძნობიარეს ხდის ენდოკრინული თერაპიების მიმართ, რომლებიც ბლოკავს ჰორმონების გამომუშავებას ან რეცეპტორებთან დაკავშირებას, რითაც აფერხებს სიმსივნის ზრდას.

ტრადიციულად, ER და PR სტატუსი ფასდება პირველადი სიმსივნის ქსოვილზე იმუნოჰისტოქიმიის (IHC) საშუალებით. თუმცა, ძუძუს კიბო ჰეტეროგენული დაავადებაა და სიმსივნის მახასიათებლები შეიძლება დროთა განმავლობაში განვითარდეს, განსაკუთრებით მეტასტაზირების დროს ან მკურნალობის საპასუხოდ. ამ მზარდმა გაგებამ გამოიწვია ინტერესის ზრდა ER/PR სტატუსის შეფასების მიმართ მოცირკულირე სიმსივნურ უჯრედებში (CTCs), რომლებიც წარმოადგენენ პირველადი ან მეტასტაზური სიმსივნეებიდან სისხლში მოხვედრილ კიბოს უჯრედებს.

სიმსივნური მარკერები ემსახურება როგორც შეუცვლელ ინსტრუმენტებს კიბოს გამოვლენისა და დიაგნოსტიკის სფეროში, რაც იძლევა ღირებულ ინფორმაციას დაავადების პროგრესირებისა და მკურნალობაზე რეაგირების შესახებ.

ER და PR-ის ბიოლოგია

ესტროგენისა და პროგესტერონის რეცეპტორები ბირთვული რეცეპტორების სუპეროჯახის წევრები არიან. როდესაც ისინი აქტიურდებიან შესაბამისი ჰორმონებით (ესტროგენი და პროგესტერონი), ეს რეცეპტორები გადაადგილდებიან უჯრედის ბირთვში, უკავშირდებიან სპეციფიკურ დნმ-ის თანმიმდევრობებს (ჰორმონზე მორეაგირე ელემენტებს) და არეგულირებენ უჯრედების პროლიფერაციაში, დიფერენციაციასა და გადარჩენაში ჩართული გენების ტრანსკრიფციას.

• ესტროგენის რეცეპტორი (ER): ძირითადად არსებობს ორი იზოფორმის სახით, ERα და ERβ. ERα არის დომინანტური ფორმა ძუძუს კიბოს დროს და მისი აქტივაცია ხელს უწყობს უჯრედების ზრდას. ERα-ს მიზანში ამოღება ისეთი პრეპარატებით, როგორიცაა ტამოქსიფენი ან არომატაზას ინჰიბიტორები, ენდოკრინული თერაპიის ქვაკუთხედია.
• პროგესტერონის რეცეპტორი (PR): ასევე აქვს ორი ძირითადი იზოფორმა, PR-A და PR-B, რომლებიც ერთი გენის პროდუქტებია. PR ექსპრესია ხშირად ინდუცირდება ესტროგენით და რეგულირდება ER-ით. PR-ის არსებობა ჩვეულებრივ მიუთითებს ფუნქციურ ER სიგნალიზაციის გზაზე და ზოგადად მიუთითებს უფრო დიფერენცირებულ და ჰორმონზე მორეაგირე სიმსივნეზე უკეთესი პროგნოზით ER-დადებით, PR-უარყოფით სიმსივნეებთან შედარებით.

ER და PR-ის ექსპრესია გადამწყვეტია ძუძუს კიბოს კლასიფიკაციისა და მკურნალობის გადაწყვეტილებების მისაღებად. ძუძუს კიბოს დაახლოებით 70-80% არის ER-დადებითი, და ბევრი მათგანი ასევე PR-დადებითია.

მოცირკულირე სიმსივნური უჯრედების (CTC) გამოვლენა

CTCs არის იშვიათი უჯრედები, რომლებიც გვხვდება კიბოთი დაავადებულთა პერიფერიულ სისხლში. ისინი წარმოადგენენ დინამიურ "თხევად ბიოფსიას", რომელსაც შეუძლია რეალურ დროში მოგვაწოდოს ინფორმაცია სიმსივნის ბიოლოგიური მახასიათებლების შესახებ, მათ შორის მისი ER/PR სტატუსის შესახებ. CTC-ების ანალიზი გვთავაზობს რამდენიმე უპირატესობას ტრადიციულ ქსოვილოვან ბიოფსიებთან შედარებით:

• მინიმალურად ინვაზიური: სისხლის მარტივი აღება შეიძლება განმეორებით ჩატარდეს, რაც იძლევა სერიული მონიტორინგის საშუალებას.
• სიმსივნის ჰეტეროგენულობის ასახვა: CTC-ებს შეუძლიათ დააფიქსირონ როგორც პირველადი, ასევე მეტასტაზური დაზიანებების მოლეკულური მახასიათებლები, რაც უზრუნველყოფს დაავადების უფრო სრულყოფილ სურათს, განსაკუთრებით შორსწასულ სტადიებზე, სადაც მეტასტაზური უბნები შეიძლება განსხვავდებოდეს პირველადი სიმსივნისგან.
• მკურნალობაზე პასუხის მონიტორინგი: CTC-ების რაოდენობის ან მათი მოლეკულური პროფილების (მაგ., ER/PR სტატუსი) ცვლილებებმა შეიძლება მიუთითოს თერაპიაზე პასუხზე ან რეზისტენტობაზე.
• პროგნოზული და პრედიქტორული მნიშვნელობა: CTC-ების არსებობამ და მახასიათებლებმა შეიძლება მოგვაწოდოს პროგნოზული ინფორმაცია და დაგვეხმაროს მკურნალობის ეფექტურობის პროგნოზირებაში.

CTC-ების გამოვლენისა და მახასიათებლების მეთოდები, როგორც წესი, მოიცავს გამდიდრების ტექნიკას (მაგ., უჯრედის ზომის ან ეპითელური მარკერების ექსპრესიის საფუძველზე, როგორიცაა EpCAM), რასაც მოჰყვება სპეციფიკური შეღებვა სიმსივნესთან ასოცირებული მარკერებისთვის, მათ შორის ER და PR ცილებისთვის, ან მათი mRNA-ს მოლეკულური ანალიზი.

ER/PR-ის კლინიკური მნიშვნელობა CTC-ებში

CTC-ებში ER/PR სტატუსის შეფასებას აქვს მნიშვნელოვანი კლინიკური შედეგები, განსაკუთრებით მეტასტაზური ძუძუს კიბოს (MBC) მქონე პაციენტებისთვის:

• დინამიური ბიომარკერი: ER/PR სტატუსი შეიძლება შეიცვალოს დაავადების მიმდინარეობისას, განსაკუთრებით ენდოკრინული თერაპიის ან ქიმიოთერაპიის ზემოქმედების შემდეგ. პაციენტს, რომლის პირველადი სიმსივნე იყო ER-დადებითი, შეიძლება განუვითარდეს ER-უარყოფითი მეტასტაზები ან CTC-ები, რაც მიუთითებს ენდოკრინული თერაპიის მიმართ რეზისტენტობაზე და მოითხოვს მკურნალობის სტრატეგიის შეცვლას.
• მკურნალობის მართვა MBC-ის დროს: თუ მეტასტაზური დაზიანების ბიოფსია რთულია, ან თუ არსებობს ეჭვი პირველად სიმსივნესა და მეტასტაზებს შორის შეუსაბამობაზე, CTC-ების ER/PR ანალიზი დაგეხმარებათ გადაწყვეტილების მიღებაში ენდოკრინული თერაპიის გაგრძელების ან დაწყების შესახებ, ქიმიოთერაპიაზე ან მიზნობრივ აგენტებზე გადასვლის წინააღმდეგ.
• მკურნალობის ეფექტურობისა და რეზისტენტობის მონიტორინგი: ენდოკრინული თერაპიის დროს ER/PR დადებითი CTC-ების შემცირება შეიძლება მიუთითებდეს დადებით პასუხზე, ხოლო ER/PR უარყოფითი CTC-ების გამოჩენამ შეიძლება მიანიშნოს რეზისტენტობის განვითარებაზე.
• პროგნოზული ინდიკატორი: კვლევები ვარაუდობენ, რომ MBC პაციენტებში ER/PR დადებითი CTC-ების არსებობას შეიძლება ჰქონდეს პროგნოზული მნიშვნელობა, ზოგჯერ კორელირებს უფრო ხელსაყრელ გამოსავალთან შესაბამისი ენდოკრინული თერაპიის პირობებში, მაგრამ ქსოვილოვანი ბიოფსიისგან შეუსაბამობა შეიძლება ასოცირებული იყოს უარეს პროგნოზთან.
• პაციენტების იდენტიფიცირება კლინიკური კვლევებისთვის: CTC-ები შეიძლება გამოყენებულ იქნას პაციენტების შესარჩევად კლინიკური კვლევებისთვის, რომლებიც ამოწმებენ ახალ აგენტებს, რომლებიც მიზნად ისახავს სპეციფიკურ ER/PR სიგნალიზაციის გზებს ან ძლევს რეზისტენტობის მექანიზმებს.

შეუსაბამობის მაჩვენებელი პირველადი სიმსივნის ER/PR სტატუსსა და CTC ER/PR სტატუსს შორის შეიძლება განსხვავდებოდეს, ჩვეულებრივ მერყეობს 20-40%-მდე, რაც ხაზს უსვამს თხევადი ბიოფსიის მნიშვნელობას რეალურ დროში მონიტორინგისთვის.

ER/PR CTC ანალიზის მეთოდოლოგია

CTC-ებში ER და PR ექსპრესიის ანალიზი ტექნიკურად რთულია მათი იშვიათობისა და მგრძნობიარე და სპეციფიკური მეთოდების საჭიროების გამო. გავრცელებული მიდგომები მოიცავს:

• იმუნოფლუორესცენტული შეღებვა: CTC-ების გამდიდრების შემდეგ (მაგ., CellSearch სისტემის ან სხვა მიკროფლუიდური პლატფორმების გამოყენებით), უჯრედები იღებება ER და PR-ის საწინააღმდეგო ანტისხეულებით, სხვა მარკერებთან ერთად, როგორიცაა ციტოკერატინები (ეპითელური კიბოს უჯრედების იდენტიფიცირებისთვის) და CD45 (ლეიკოციტების გამოსარიცხად). შეღებილი უჯრედების ვიზუალიზაცია და რაოდენობრივი განსაზღვრა ხდება ავტომატური მიკროსკოპიის გამოყენებით.
• mRNA ექსპრესიის ანალიზი: რნმ შეიძლება ამოღებულ იქნას გამდიდრებული CTC პოპულაციებიდან და ER1 (ESR1 ER-სთვის) და PGR (PR-სთვის) გენის ექსპრესია შეიძლება რაოდენობრივად განისაზღვროს RT-qPCR-ის გამოყენებით. ეს მეთოდი გვაწვდის ინფორმაციას გენის ტრანსკრიფციის შესახებ და არა ცილის ექსპრესიის შესახებ.
• ერთუჯრედიანი ანალიზი: მოწინავე ტექნიკა იძლევა ცალკეული CTC-ების იზოლაციისა და მოლეკულური მახასიათებლების დადგენის საშუალებას, რაც შესაძლებელს ხდის ER/PR ჰეტეროგენულობის დეტალურ შეფასებას ერთი უჯრედის დონეზე.
• ნაკადური ციტომეტრია: ზოგიერთი მეთოდი იყენებს ნაკადურ ციტომეტრიას ER/PR ექსპრესიის გამოსავლენად, განსაკუთრებით CTC-ების უფრო მაღალი გამოსავლიანობის მქონე ნიმუშებში.

ამ მეთოდების სტანდარტიზაცია მიმდინარეობს სხვადასხვა ლაბორატორიებსა და კლინიკურ კვლევებში რეპროდუქციულობისა და შესადარებლობის უზრუნველსაყოფად.

ხშირად დასმული კითხვები (FAQ)

გამოწვევები და სამომავლო პერსპექტივები

ER/PR CTC ანალიზის პერსპექტიულობის მიუხედავად, რჩება რამდენიმე გამოწვევა:

• CTC-ების მცირე რაოდენობა: CTC-ების უკიდურესი იშვიათობა ართულებს მათ იზოლაციასა და დახასიათებას და მიდრეკილს ხდის ვარიაბელობისკენ.
• ტექნიკური სტანდარტიზაცია: უნივერსალური სტანდარტიზაციის ნაკლებობა CTC გამდიდრების, გამოვლენისა და ER/PR შეფასების მეთოდებისთვის ართულებს შედეგების პირდაპირ შედარებას კვლევებს შორის.
• კლინიკურად ქმედითი ზღურბლების განსაზღვრა: CTC-ებში ER/PR პოზიტიურობის მკაფიო ზღურბლების დადგენა, რომლებიც საიმედოდ პროგნოზირებენ მკურნალობაზე პასუხს ან კლინიკურ შედეგებს, გადამწყვეტია.
• CTC ჰეტეროგენულობა: ყველა CTC არ არის თანაბრად მეტასტაზური და არსებობს ჰეტეროგენულობა ER/PR ექსპრესიაში ერთი პაციენტის CTC პოპულაციაშიც კი.
• CTC-დან მიღებული ER/PR-ის რელევანტურობა: შემდგომი კვლევაა საჭირო იმის სრულად გასაგებად, თუ როგორ კორელირებს ER/PR სტატუსი CTC-ებზე მყარი მეტასტაზური დაზიანებების ER/PR სტატუსთან და როგორ უნდა იყოს ეს ინფორმაცია საუკეთესოდ ინტეგრირებული კლინიკური გადაწყვეტილების მიღების პროცესში.

სამომავლო მიმართულებები მოიცავს CTC ER/PR ანალიზის ინტეგრირებას თხევადი ბიოფსიის სხვა მარკერებთან (მაგ., ctDNA, ეგზოსომური მარკერები), რათა უზრუნველყოს სიმსივნის ბიოლოგიის უფრო ჰოლისტიკური ხედვა, უფრო მგრძნობიარე და სპეციფიკური ტექნოლოგიების შემუშავება CTC იზოლაციისა და ანალიზისთვის და ფართომასშტაბიანი კლინიკური კვლევების ჩატარება, რათა საბოლოოდ დადგინდეს ER/PR CTC ტესტირების კლინიკური სარგებლიანობა და ხარჯ-ეფექტურობა ძუძუს კიბოს რუტინულ მართვაში. ეს განვითარებადი სფერო შეიცავს მნიშვნელოვან პოტენციალს ძუძუს კიბოს მკურნალობის პერსონალიზაციისა და ოპტიმიზაციისთვის.

გამოყენებული ლიტერატურა

1. Alix-Panabières, C., & Pantel, K. (2016). Clinical applications of circulating tumor cells and circulating tumor DNA as liquid biopsy. Cancer Discovery, 6(5), 479-491.
2. Bidard, F. C., et al. (2019). Clinical utility of circulating tumor cells in metastatic breast cancer: a European consensus. NPJ Breast Cancer, 5(1), 30.
3. Ignatiadis, M., et al. (2018). International Society of Liquid Biopsy (ISLB) consensus recommendations on the use of circulating tumor cells for clinical decision-making in metastatic breast cancer. Annals of Oncology, 29(4), 856-867.
4. Zhang, W., et al. (2017). ER/PR expression of circulating tumor cells in breast cancer: A systematic review and meta-analysis. Oncotarget, 8(4), 6296-6307.
5. De Luca, A., et al. (2020). ER/PR and HER2 analysis in circulating tumor cells: current status and clinical impact. Cancers, 12(11), 3266.